La infección por Trypanosoma cruzi disminuye el desarrollo del melanoma maligno e incrementa la supervivencia en ratones C57BL/6 / Trypanosoma cruzi infection decreases malignant melanoma development and increases survival in C57BL/6 mice

Diversos agentes infecciosos interfieren en la progresión del cáncer. En esta investigación se estudió el efecto de la infección o inmunización con Trypanosoma cruzi (Tc) sobre el desarrollo del melanoma maligno. Se utilizaron 258 ratones machos C57BL/6 divididos en 5 grupos melanoma: melanoma control, melanoma Tc inmunizado, melanoma Tc agudo, melanoma Tc crónico y melanoma Tc infectado; 3 grupos controles: control sano, control Tc agudo, control Tc crónico. 100.000 células de melanoma B16-BL6 fueron inoculados vía intramuscular a los grupos melanoma; 3 ó 20 tripomastigotes/g de peso fueron inoculados vía intraperitoneal a los grupos Tc crónicos o Tc agudos previo a la inoculación del melanoma, respectivamente, el grupo melanoma Tc inmunizado fue inoculado con 30.000 epimastigotes fijados en formol y suspendidos en adyuvante completo de Freund, y el grupo melanoma Tc infectado fue inoculado con células de melanoma obtenidas de ratones melanoma Tc agudo. Se evaluó volumen tumoral, supervivencia, parasitemia e histopatología tumoral. Los grupos melanoma Tc: agudo, crónico y melanoma infectado, respectivamente, mostraron una disminución significativa del desarrollo tumoral y de la supervivencia al ser comparados con los grupos melanoma control e inmunizado. Los estudios histopatológicos mostraron áreas de necrosis asociadas con depósitos de melanina, degeneración citopática tumoral y amastigotes intracelulares contenidos en vacuolas parasitofóricas. En conclusión, Tc inhibe el desarrollo tumoral del melanoma maligno y aumenta la supervivencia de ratones C57BL/6, fenómeno que podría estar relacionado con la capacidad invasiva tumoral del parásito y a la respuesta inmune generada.

Some infectious pathogens have the capacity to affect cancer progression. In the present paper we studied the effect of infection or immunization with Trypanosoma cruzi (Tc) against malignant melanoma development. We worked on 258 C57BL/6 male mice divided in five melanoma groups: control melanoma, melanoma Tc acutely infected, melanoma Tc chronically infected, melanoma Tc immunized and infected melanoma; and three control groups: healthy, Tc acutely infected and Tc chronically infected. 100.000 B16-BL6 melanoma cells were inoculated in the thigh of melanoma groups; 3 or 20 trypomastigotes/g were inoculated intraperitoneally in chronic or acute Tc groups, before the melanoma injection, respectively; melanoma Tc immunized were subcutaneously inoculated with 30.000 formaldehide-fixed epimastigotes diluted in complete Freund´s adjuvant and the infected melanoma group was inoculated with melanoma cells obtained from melanoma Tc acutely infected mice. We evaluated survival, parasitemia, tumor volume and tumor histopathology. Results showed that in mice infected with Tc, the tumor development and survival were significantly lower as compared with control melanoma and melanoma Tc immunized. Histopathologically, the tumor displayed necrosis areas with melanin deposits, cytopathic degeneration and amastigotes in parasitophorous vacuoles. In conclusion, Tc inhibits the development of malignant melanoma, increasing C57BL/6 survival, a phenomena that could be related to the parasite tumoral invasive capacity, its ability to produce melanoma cell lysis and to induce a robust immune response.

Electrocardiography repolarization abnormalities are characteristic signs of acute chagasic cardiomyopathy / Los trastornos de la repolarización ventricular son signos característicos de la cardiomiopatía chagásica aguda

Chagas disease is a tropical parasitic disease caused by the protozoan Trypanosoma cruzi (T. cruzi), whose reemergence as oral outbreaks is currently a public health problem in Venezuela. T. cruzi infection induces myocardial damage; which according to the microvascular theory, is derived from parasite-mediated disruption of the endothelium, inducing platelet aggregation and ischemia. In order to determine whether ventricular repolarization disorders observed in human patients are characteristic signs of the disease that can be reproduced in NMRI mice; we studied 12 patients with a well documented diagnosis of acute Chagas disease, based on epidemiological, clinical, parasitological and molecular data. Also, T. cruzi isolates from the blood of human patients from other Venezuelan geographical regions were characterized and inoculated in albino NMRI mice. A standard 12-lead and bipolar electrocardiogram configuration were done in human patients during the acute phase of the disease and in mice, after three weeks of infection. Results in human showed repolarization disorders, characterized by: negative, bimodal or biphasic T waves, ST segment depression or elevation and early repolarization. In mice a significant increase in T wave amplitude, increased QT interval duration and elevation or depression of ST segment were observed. These findings were evidenced in all infected mice, suggesting that electrocardiographic repolarization abnormalities in a well documented clinical and epidemiological context are signs that increase the sensitivity for the diagnosis of acute Chagas´ disease.

La enfermedad de Chagas es una hemoparasitosis causada por Trypanosoma cruzi (T. cruzi), cuya re-emergencia como epidemias por contaminación oral es actualmente un problema de salud pública en Venezuela. La infección por T. cruzi causa miocarditis; que de acuerdo con la teoría microvascular deriva del daño del endotelio vascular, al inducir agregación plaquetaria e isquemia. Con el objetivo de demostrar que los trastornos de repolarización son signos propios de la miocarditis chagásica aguda (MChA) reproducibles en modelos animales, estudiamos 12 pacientes humanos con diagnostico bien documentado de MChA, basado en datos epidemiológicos, clínicos, parasitológicos y moleculares. A partir de la sangre de los pacientes obtuvimos los aislados de T cruzi, los caracterizamos molecularmente y los inoculamos en ratones albinos NMRI; paralelamente, aislados de T cruzi provenientes de otras regiones de Venezuela fueron también ensayados. Tanto en los pacientes humanos como en los ratones con Chagas agudo, se realizaron estudios electrocardiográficos en 12 derivaciones estándares y en configuración bipolar, respectivamente. En humanos observamos trastornos de la repolarización ventricular caracterizados por: onda T negativa, bimodal o bifásica; elevación o depresión del segmento ST y despolarizaciones tempranas. En ratones observamos incrementos en la amplitud de la onda T, aumento en la duración del intervalo QT y elevación o depresión del segmento ST. Estos hallazgos fueron evidenciados en todos los ratones infectados con los diferentes aislados, sugiriendo que los trastornos de repolarización, en un adecuado y bien documentado contexto epidemiológico y clínico, son signos que aumentan la sensibilidad para el diagnóstico de MChA.

Persistence of Chagas disease active transmission among dogs in Venezuela rural community / Persistencia de la enfermedad de Chagas y trasmisión activa entre perros en una comunidad rural de Venezuela

Objective: To determine human and canine seroprevalence, entomologic indexes and risk factors for Chagas’ disease transmission in a rural community. Method: 48 houses, 162 people, and 55 canines were sampled. Serum anti-Trypanosoma cruzi antibodies were determined by means of ELISA and MABA techniques using recombinant antigens. Triatomine collection were carried out by passive search by community and an active/systematic house, T. cruzi infection was determined by direct microcopy. Results: 2,47% of the humans and 18.18% of the canines were positive to serum anti-T.cruzi antibodies. The triatomine bugs found was 98.24% and 1.76% Eratyrus mucronatus. Vector’s indexes were: 0 % vector infection, 18.75% indoor house infestation, 25% outdoor house infestation, 0% indoor house colonization, 83.33 % outdoor house colonization and 4.16% house co-infestation. We obtained an association between house triatomine infestation and visualization of wild animals in the house. Discussion: there are not vector transmission of Chagas disease in the community, however, high dog’s prevalence is related to their biological habits and behavior.

Objetivo: Determinar la seroprevalencia humana y canina del índice entomológico y factores de riesgo para la transmisión de la enfermedad de Chagas en una comunidad rural. Materiales y Método: Se incluyeron 48 casas, 162 personas, y se tomaron muestras de 55 caninos. se determinaron anticuerpos séricos anti-Trypanosoma cruzi mediante técnicas de ELISA y MABA, utilizando antígenos recombinantes. La recolección de triatominos se llevó a cabo mediante búsqueda pasiva sistemática en la comunidad y casas. La infección por T. cruzi se determinó mediante microscopia directa. Resultados: El 2,47 % de los humanos y 18,18 % de los caninos fueron positivos al suero anti-T.cruzi. Los triatominos encontrados fueron T. maculata (98,24 %) y Eratyrus mucronatus (1,76%). No hubo infección vectorial, el 18,75 % de infestación intradomiciliaria, 25 % de infestación extradomiciliaria, no hubo colonización intradomiciliar, el 83,33 % de colonización extradomiciliar y el 4,16 % de infestación intradomiciliar. Se obtuvo una asociación entre infestación intradomiciliar por triatominos y la visualización de los animales en la casa. Discusión: No se observo transmisión vectorial de la enfermedad de Chagas en la comunidad, sin embargo, la alta prevalencia en perros está relacionada con sus hábitos biológicos y el comportamiento.

Efectos de la administración crónica de alcohol sobre la conducta motora y su relación con el sistema colinérgico muscarinico en ratas sprague dawley bajo estrés discontinuos / Effects of chronic administration of alcohol on motor behavior and its relation to the muscarinic cholinergic system in Sprague Dawley rats under stress discontinuous

El alcohol y el estrés son problemas de salud pública que afectan el Receptor Colinérgico Muscarínico (RCM). En el presente trabajo se estudia el efecto de ambos fenómenos sobre la funcionalidad y densidad del RCM. Métodos: 43 ratas Sprague Dawley se dividieron en 4 grupos: Control (n=12), Estrés (n=11), Alcohol (n=10) y Alcohol-Estrés (n=10). A los grupos alcohol se le administró diariamente etanol al 10 % ad libitum y los grupos Estrés se sometieron a nado forzado a 5°C por 5 min tres veces/semana. Resultados: las ratas tratadas con alcohol presentaron adicción e hipermotilidad, siendo el efecto mayor en el grupo alcohol-estrés. Escopolamina incremento la motilidad en todos los grupos. No hubo diferencias significativas entre los grupos en el desempeño en el Rotarod. La densidad de los RCM estuvo disminuida significativamente en Hipocampo en el grupo alcohol. Conclusión: el alcohol induce trastornos del RCM relacionados a hipermotilidad

Alcohol consumption and stress are health problems, which affects the Cholinergic Muscarinic Receptor (CMR) system. Here we studied the effect of both phenomena on CMR functionality and densities. Methods: 43 Sprague Dawley rats were divided in 4 groups: Control (n=11), Stress (n=10), Alcohol (n=10) and Alcohol-Stress (n=9). Alcohol groups received 10% ethanol ad libitum in substitution of water every day, stress groups were submitted 3 days at week to 5 min force swimming at 5°C. Results: rats that had alcohol displayed addiction and hypermotility, the effect was higher at alcohol-stress group. Scopolamine significantly increased motility in all groups. No differences were observed at Rotarod performance. CMR density was decreased in hippocampus of rats belonging to alcohol group. Conclusion: alcohol induces motor disturbances related to CMR system

Estudio seroepidemiológico y entomológico sobre la enfermedad de Chagas en un área infestada por Triatoma maculata (Erichson 1848) en el centro-occidente de Venezuela / An entomological and seroepidemiological study of Chagas' disease in an area in central-western Venezuela infested with Triatoma maculata (Erichson 1848)

En el presente trabajo se realizó un estudio seroepidemiológico, entomológico y de factores de riesgo para la infestación de las viviendas en un área infestada por Triatoma maculata (Parroquia Xaguas, Municipio Urdaneta, Estado Lara, Venezuela). Se muestrearon 140 viviendas, 509 personas y 110 cánidos, a los cuales se les determinó anticuerpos séricos anti-Trypanosoma cruzi mediante ELISA y MABA, utilizando antígenos recombinantes. La infección por Tr. cruzi de los triatominos fue determinada por microscopía óptica y PCR. Los resultados mostraron una seroprevalencia en humanos de 1,57 por ciento y en cánidos de 6,36 por ciento. De los 545 triatominos capturados 97,98 por ciento fueron T. maculata, 1,65 por ciento Eratyrus mucronatus y 0,37 por ciento Panstrongylus geniculatus; con índices vectoriales de infección 0,36 por ciento, infestación 16,4 por ciento, colonización 39,1 por ciento, coinfestación 8,6 por ciento y dispersión 100 por ciento. La presencia de vectores en el domicilio y peridomicilio estuvo asociada a la presencia de gallinas, desorden en el peridomicilio, caprinos, gallineros y/o distribución del domicilio. Los resultados permiten concluir que T. maculata es el vector predominante en la región, con capacidad de infestar y colonizar el domicilio y estaría involucrado en la transmisión de la enfermedad de Chagas.

This article presents a study on seroepidemiological, entomologic, and risk factors for domiciliary infestation in a circumscribed area infested with Triatoma maculata in Parroquia Xaguas, Urdaneta Municipality, Lara State, Venezuela. One hundred and forty households, 509 persons, and 110 dogs were sampled. Serum anti-Trypanosoma cruzi antibodies were determined by means of ELISA and MABA techniques using recombinant antigens. Tr. cruzi infection in the triatomines was determined by direct microscopy and PCR. According to the results, 1.57 percent of humans and 6.36 percent of dogs were positive for serum anti-Tr. cruzi antibodies. Triatomine species were: 97.98 percent T. maculata, 1.65 percent Eratyrus mucronatus, and 0.37 percent Panstrongylus geniculatus. Vector indices were: 0.36 percent vector infection, 16.4 percent household infestation, 39.1 percent household colonization, 8.6 percent household co-infestation, and 100 percent vector dispersion. Domiciliary and peridomiciliary infestation was associated with the presence of chickens and disorderly goat corrals, chicken coops, and domiciliary distribution. The results strongly suggest that T. maculata is the predominant Tr. cruzi vector in the area and that due to its capacity to infest and colonize human dwellings, it could be involved in Chagas' disease transmission.

Farmacología molecular de la enfermedad de Chagas / Molecular pharmacology of the chagas disease

La enfermedad de Chagas es una parasitosis exclusiva del continente americano. Es endémica en 21 países, con 18-20 millones de personas infectadas y 100 millones en riesgo de infección. En Venezuela la enfermedad de Chagas es una enfermedad reemergente cuya frecuencia alcanza en algunas comunidades rurales el 22 por ciento. La prevención de la transmisión de la enfermedad de Chagas es un proceso sencillo, consiste en el control y eliminación del vector mediante rociamientos sistemáticos de las viviendas en las zonas endémicas y a través de políticas habitacionales, donde se sustituya los ranchos por viviendas higiénicas consolidadas. La enfermedad de Chagas no tiene tratamiento y los pacientes infectados con T. cruzi inexorablemente evolucionan hacia la miocardiopatía chagásica crónica cuya manifestación sindromática más frecuente es la insuficiencia cardíaca congestiva y/o las arritmias cardíacas, de difícil tratamiento y cuyo desenlace más frecuente es la muerte súbita. En los últimos años importantes avances han sido realizados en la fisiopatología de las miocardiopatías no chagásicas, cuyas bases moleculares parecen semejarse a la de las bases de la miocardiopatía chagásica crónica.En el presente trabajo se presenta una revisión de los eventos moleculares que parecen estar involucrados en la génesis y desarrollo de la miocardiopatía chagásica crónica, planteándose que la miocardiopatía chagásica crónica se inicia como un desbalance en los factores humorales y neurales que afectan el miocardio, el cual es causado por mediadores de la respuesta inmune, los cuales inician y mantienen una cascada de eventos, que afectan los elementos involucrados en las señales transmembranas, como por ejemplo; receptores para neurotransmisores (colinérgicos y adrenérgicos), sistemas transductores de la señal (proteína G) y efectores de la señal (canales iónicos o segundos mensajeros). Finalmente, se sugiere que el conocimiento de estos factores permitiría planear racionalmente estrategias terapéuticas no tripanomicidas

Partial characterization of endogenous modulators of muscarinic acetylcholine receptors in human frontal cortex / Caracterización preliminar de un modulardor endógeno del receptor colinérgico muscarínico en corteza cerebral humana

Se reporta la existencia de un factor soluble endógeno de bajo peso molecular, derivado de la corteza frontal humana, el cual es modular la unión de [3H]-QNB al receptor colinérgico muscarínico. El efecto de esta sustancia fue de naturaleza no competitiva, ya que afectaba la capacidad máxima de unión, pero no la afinidad; sin embargo, un perfil bifásico, con inhibición hasta un 88-90 por ciento de la unión y una ulterior recuperación de hasta 50-60 por ciento de la inhibición, también fue observado. La acción de esta sustancia pareció ser reversible, resistente a la acción de la tripsina, termoestable, y presentó un peso molecular no mayor de 10.000 Da. Los resultados sugieren la posible existencia de heterogeneidad molecular en el factor endógeno aislado o la presencia de multiples sitios de acción sobre los cuales actuaría este factor

Unión P[3H]-QNB al receptor muscarínico humano en presencia de diferentes buffers / Union of P[3H]-QNB at muscarinic receptor human in presence of different buffers

Se estudio el perfil de unión de [3H]-Benzilato de Quinuclidinilo ([3H]-QNB) al receptor colinérgico muscarínico (RCM) de corteza frontal (CFH) e hipocampo humano (HPH) en presencia de diferentes buffers. Cuando las fracciones de CFH se prepararon y ensayaron en Buffers TRIS, FOSFATO o HEPES, la unión fue compatible con una discreta cooperatividad homotrópica positiva (coeficiente de Hill: 1.10-1.37). Cuando los ensayos de unión de [3H]-QNB al RCM de CFH se realizaron con buffers imidazol o citrato, la cinética resultó hiperbólica simple. El fenómeno de cooperatividad positiva se encontró en HPH mediante el uso de buffer fosfato, pero no con iris e imidazole. El uso de borato como buffer para preparar y ensayar las fracciones de CFH o HPH indujo una cinética compatible con cooperatividad homotrópica negativa o heterogeneidad, con 32-36 por ciento de sitios de alta afinidad y 64-68 por ciento de baja afinidad. El efecto inhibitorio de la fuerza iónica sobre la unión de [3H]-QNB fue similar en borato, imidazol, tris, herpes y citrato. A altas concentraciones, el efecto del buffer fosfato fue también inhibitorio, sin embargo, a bajas concentraciones, se observó un 10 por ciento de aumento en la unión. Estos resultados sugieren que la unión de [3H]-QNB al RCM humano es compleja y dependiente de las condiciones del medio.